細胞elisa試劑盒實驗以其靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對實驗的檢測效果影響較大,如不注意,就有可能產生不準確的結果。今天我們就來介紹一下實驗中加樣可能會碰到的問題。 1、加樣時間過長。遇到這種情況,如果標本為血清的話,可以將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;如果標本為血漿,就必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內;
2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱的時候需要等待。如果標本較多時,可以分批操作,加樣后一定要及時放入孵箱;
3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外,血清或血漿標本分離不好即進行加樣。遇到這種情況,可以在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。如果采用AT或其他全自動加樣,請選擇FAME或其他處理儀器加酶試劑。
細胞elisa試劑盒由哪些部分組成?
1、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
2、酶標記的抗原或抗體(結合物);
3、酶的底物;
4、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
5、結合物及標本的稀釋液;
6、洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
7、酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。